4、临床症状 4.1 猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎 在抗原上它们是完全不同的疾病,临床上PED和TGE很难区别,仅仅是TGE的临床症状比PED还要重些。发病开始时厌食,以后腹泻,并且以水样的喷射状腹泻为特征,猪舍四周墙上和地面沾满了水粪,有一股特别的臭味。体温一般不升高。用任何药品治疗都无效。大猪一般7~10天自行康复,但抵抗力弱的猪、尤其有并发症时会死亡,新生仔猪由于严重脱水,加上母猪发病时无奶,死亡率可达100%。10日龄以上仔猪死亡率较低。总的规律是猪只的日龄越小,越易死亡。病猪除腹泻外,往往呕吐,特别在吃奶后很快出现。有的母猪流产,有时流产率达25%。
4.2 猪轮状病毒病 是仔猪的一种疾病,在自然情况下,7日龄以下的新生仔猪很少发生,一般发生在13~39日龄的仔猪,平均20日龄,初产母猪产的仔猪较易感染病毒。潜伏期12~24小时,开始出现厌食、不安、偶尔有呕吐。严重的在1~4小时后发生水样腹泻,粪便呈黄色到白色,含絮状物。腹泻可持续3~5天,在腹泻2~5天后可能有死亡。随着年龄的增大死亡率降低,14日龄以上的猪很少死亡。
5、病理解剖 解剖这三种病毒性腹泻的病猪,病变常局限在胃肠道。胃内充满凝乳块,胃黏膜充血。小肠内充满黄色液体,并含有未消化的凝乳块,肠壁变薄呈半透明。在普通显微镜下可以见到绒毛萎缩,肠淋巴结水肿,其他脏器看不到病变。但TGE可能在肺部有炎性反应。
6、诊断 引起猪腹泻和呕吐的疾病很多。如大肠杆菌病、沙门氏菌病、伪狂犬病、梭菌病、猪痢疾、血凝脑脊髓炎、猪瘟、球虫病等,需仔细鉴别。
根据流行病学,发病季节.水泻。呕吐。所有猪发病,大猪一般不死,日龄越小死亡率越高.病变主要在肠道,传播迅速,治疗无效等基本上可以确定为病毒性疾病。7日龄以下不发病在13~39日龄发病的仔猪一般为轮状病毒病,7日龄以内发病死亡的往往是TGE或PED。下面的辅助方法可帮助诊断:绒毛萎缩:在普通显微镜下观察,绒毛缩短,这是特征性的病变。粪便酸性:细菌性腹泻的粪便一般为碱性,病毒性腹泻的粪便呈酸性:可用pH试纸测一下。最终的诊断还要靠实验室检查。送检发病未死乳猪的小肠,用荧光抗体技术可在2小时内得出明确诊断。
7、免疫 7.1 免疫机理 在免疫学中起主要作用的免疫球蛋白(1gS)是IgG和IgA。IgG也叫循环抗体,它的主要作用是用来抵御全身感染,而IgA主要用来抵御黏膜感染。IgG的分子量较大,不容易穿过肠壁进入肠腔,它们对胃酸和消化酶的抵抗力较差。IgA也叫分泌抗体,分子量较小,它们在黏膜免疫中起主要作用,可以抵御胃酸和消化酶的消化,并且与肠黏膜有亲和作用所以IgA在肠道中起重要的作用。
PED、TGE和猪轮状病毒病都是肠道病,都是通过消化道感染的。它们的靶细胞都是肠绒毛上皮细胞,引起肠绒毛的萎缩脱落,是导致动物消化泛反乱、酸中毒和脱水的原因。在预防上,如果在肠腔内经常有抗体存在,就可以不断地中和猪体摄人的病毒,从而起到保护作用。
猪出生时体内无免疫球蛋白,出生后通过初乳获得免疫抗体。初乳中IgS主要是IgG,也有多量的IgA,新生仔猪吮吸初乳后通过肠上皮进入循环,这样为新生仔猪提供了像母猪那样的血清抗体,这些体液抗体的功能主要是抵抗全身感染而非肠内感染。所以,在仔猪哺乳期,进入消化道的病毒是通过与母乳中的抗体在肠道中不断中和而起主要保护作用的.而原先进入体内循环的抗体再通过肠腔与进入消化道内的病毒起作用就次要了,这种免疫机理就是被动免疫,也称为乳汁免疫。
在主动免疫中,当猪体自然感染PEDV、TGE\和RV时,主要是肠黏膜的局部免疫,病毒对肠腔的刺激既可产生IgG,也可产生IgA,这是体液免疫,同时可产生细胞免疫。肠上皮细胞形成的IgA分泌片可有效地将IgA从黏膜固有层转运进入肠腔。这就解释了在自然发病后活下来的猪中,PED、TGE和猪轮状病毒病的保护率很高,极少第2次发病。
7.2 疫苗 在实验室中,用PEDV、TGEV和RV的强毒通过肌肉、静脉、皮下、皮内、气管和腹腔等非口途径攻击敏感猪,经多天的临床观察,未见动物有腹泻和呕吐的临床症状,再采集小肠进行免疫荧光检查也未证实在小肠绒毛上皮细胞的胞浆中有病毒存在而用PEDV、TGEV和RV的强毒通过口服时都能使阴性猪发病产生典型的临床症状,用免疫荧光检查也能证实小肠绒毛上皮细胞的胞浆中有病毒存在。
这就从理论上启示我们,PED、TGE和猪轮状病毒病的最理想免疫途径应该是口服活毒,而这些活病毒应该是既不能引起猪发病,又要有一定的毒力,使病毒进入肠固有层以有足够的刺激产生IgG和IgA;如果毒力太弱病毒进入肠道不能增殖或有限增殖,对肠表层下IgA浆细胞的抗原刺激不足,相应地IgA产生极少。但研制这恰到好处的中毒有一定的难度,同时口服的免疫方法的可操作性也不强行报道曾试用低代次细胞培养TGE强毒诱导被动免疫,但结果表明口/鼻内感染的母猪血清学转化和仔猪的保护率不规律。如果母猪妊娠期间把TGE弱毒一次注射到肠腔。对其所产仔猪用强毒口服,结果保护性很差。然而在母猪妊娠期间连续肠内注射弱毒,其仔猪攻毒后有较好的保护力,这提示了口服免疫需要多次才行。有报道(美国《猪病学》第八版),各种不同的TGE试验疫苗和两种商品疫苗给产前母猪注射,其结果是母猪所产仔猪的发病率和死亡率都有小幅度的下降,很不理想,原因可能是病毒通过注射进入体内后不能在体内,尤其在肠黏膜的靶细胞内复制繁殖.病毒很快被机体消灭,不能持续地刺激机体,抗体效价就不高。
鉴于PEDV、TGEV和RV以上的免疫特性,我们研制了“猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒三联灭活疫苗”。这三种病毒分别在三种敏感的细胞上繁殖,其病毒效价(TCID50)均大于1075每毫升。以兽用白油为佐剂W/O/W的双向苗。经交巢穴注射后,病毒抗原在体内缓慢释放,可持续地刺激机体产生抗体,由于该疫苗是水包油包水,相对单纯的油包水疫苗产生有效免疫的时间短些。实验室免疫试验表明,免疫母猪后其仔猪的被动保护率在95%以上,肉猪的主动免疫保护率在90%左右;大规模生产试用,免疫母猪后其仔猪的被动保护率在85%~95%,肉猪的主动免疫保护率在70%~90%。 上一页 [1] [2] [3] 下一页 |