4．2补体结合试验

    补体结合试验(CFT)也是检测猪血清中Mhp抗体的有效试验之一，包括微管补体结合试验和微量修正补体结合试验。补体结合试验在实验接种猪和自然感染猪中，CFT阳性率与猪肺部病变有较好的相关性，但仍存在着很高的假阳性和假阴性。Lloyd等认为，假阴性是由于循环抗原的影响，而假阳性是由于感染了其他支原体出现交叉反应或是因为没产生或发现病变。CFF不能确定4—9周龄猪的感染状况。CFT在敏感性和特异性方面存在一定的局限性，但如果综合运用临诊和病理显微检查，CFT仍是确定Mhp感染状况的有效手段之一。

    4．3酶联免疫吸附试验

    酶联免疫吸附试验是目前国内外最常用于诊断Mhp的方法之一，具有能进行定量分析、敏感性高、特异性强的特点。Bmggmann等首次报道以SDS提取物作抗原，用间接ELISA检测Mhp抗体的敏感性高，但易与絮状支原体和猪鼻支原体发生非特异性交叉反应。Nicolet等改用Tween20提取物作抗原，用间接ELISA检测Mhp抗体，结果比用支原体全菌和SDS溶解物作抗原有更高的特异性，但与絮状支原体也存在部分交叉反应。Bereiter等用改进的Tween20 ELISA降低了因絮状支原体感染引起的交叉反应。Fut0克隆了Mhp的46ku表面抗原(p46)基因，诱变后在E coli中表达，用提纯的重组P46蛋白作抗原用于ELISA诊断，结果发现与其他猪支原体无交叉反应。Feld等建立了一种单克隆抗体阻断ELISA，此法可从单个抗原决定簇上检测Mhp抗体，而且不需完全纯化抗原。随后，Potier等建立了一种用Mhp特有的40ku膜蛋白作抗原的单克隆抗体阻断ELISA，用此法检测接种了猪鼻支原体和絮状支原体的SPF猪和感染Mhp猪的血清，发现Mhp与絮状支原体和猪鼻支原体无交叉反应。Eun Jin

    Jang等(2007)将黏附因子P97在E. coli中表达，使猪肺炎支原体裂解成6个片段，采用其中的50 KDa的蛋白做为抗原做ELISA，结果发现特异性很强。在国内，刘茂军等(2007)选用猪肺炎支原体Mhp J株全菌膜蛋白作为包被抗原，建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA检测方法，结果显示此方法灵敏度很高。

    4．4表面细胞质基因组共振实验

    Kim TJ(2006)利用P97粘附因子中的分子量为30 KDa的蛋白为抗原建立了检测猪肺炎支原体抗体滴度的表面细胞质基因组共振实验。该实验和传统ELISA方法同时检测了来自6个猪场的70份血清，结果显示表面细胞质基因组共振实验具有很高的特异性和敏感性，而且两种方法有正相关性。

    5 小结

    用于猪支原体肺炎的诊断方法很多，以上是目前国内外报道较多且常用的几种检测技术，每种方法都有各自的优缺点。在临床应用时，除根据试验条件和目的选择合适的检测技术外，还应结合临床症状和病理组织学病变进行综合诊断，以得到准确可靠的诊断结果。

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